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Laboratorio di Tecniche di Biologia Cellulare

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Anno accademico 2006/2007

Codice dell'attività didattica
B8596
Docenti
Prof. Claudio Dati
Prof. Giovanna Gambarotta
Corso di studi
Scienze Biologiche
Anno
3° anno
Periodo didattico
Quarto periodo didattico
Tipologia
A scelta dello studente
Crediti/Valenza
4 crediti
SSD dell'attività didattica
BIO/06 - anatomia comparata e citologia
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Sommario insegnamento

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Obiettivi formativi

Fare acquisire le conoscenze teoriche e pratiche alla base dalle comuni tecniche di colture cellulari, le caratteristiche tecniche della strumentazione utilizzata e le misure di sicurezza associate alle manipolazioni. Saper trovare le informazioni on-line, saper documentare e discutere i propri risultati, saper lavorare in gruppo.
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Risultati dell'apprendimento attesi

Alla fine del corso gli studenti dovranno saper organizzare un laboratorio di colture cellulare, mantenere una linea cellulare continua in coltura, contare e piastrare una quantità nota di cellule, congelare e scongelare le cellule, acquisire e presentare immagini digitali e filmati delle proprie cellule in coltura.
MODALITA' DI ESAME: L'esame si svolge, di norma, come segue: consegna di relazioni di laboratorio e valutazione individuale delle conoscenze tecniche e della capacità di lavorare in sterilità sotto cappa.
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Programma

Sicurezza nel laboratorio di colture cellulari. La cappa per colture cellulari. Lavoro in sterilità. Conteggio delle cellule con l’emocitometro.
Presentazione della strumentazione del laboratorio colture e  delle manipolazioni da eseguire. L’incubatore per colture cellulari. I recipienti per colture cellulari.
Componenti dei terreni  di coltura. Le contaminazioni. Modalità di sterilizzazione.
I incontro: descrizione del progetto sperimentale, caratteristiche tecniche della strumentazione del laboratorio di colture cellulari e modalità di uso. Preparazione di 2 nuove piastre seminate ciascuna con 250.000 cellule
II incontro: tripsinizzazione, conta cellulare e allestimento di 8 piastre con 25.000 cellule ciascuna per la curva di crescita. Preparazione di 2 nuove piastre con 250.000 cellule (A, B).
III incontro: Tripsinizzazione e conta cellulare delle piastre 1 e 2 per curva di crescita. Acquisizione immagini. Mantenimento della linea cellulare: preparazione di 1 piastra (A) con 250.000 cellule. Congelamento della piastra B. 

IV incontro: Tripsinizzazione e conta cellulare delle piastre 3 e 4 per curva di crescita. Scongelamento e messa in coltura delle cellule precedentemente congelate (B).

Mantenimento della linea cellulare: preparazione di 1 piastra (A) con 250.000 cellule. 

V incontro: Conta cellulare delle piastre 5 e 6 per curva di crescita.

Stima della sopravvivenza delle cellule scongelate (B) mediante conta cellulare in seguito a colorazione con blu tripano. Mantenimento della linea cellulare: preparazione di 1 piastra (A con 250.000 cellule. 

VI incontro: Conta cellulare delle piastre 7 ed 8 per curva di crescita.

Mantenimento della linea cellulare: preparazione di 2 piastre con 250.000 cellule. Calcolo della velocità di crescita della linea cellulare.
VII incontro: Prova pratica con valutazione delle capacità tecniche di ogni singolo operatore. Mantenimento della linea cellulare: preparazione di 1 piastra con 250.000 cellule e di 4 piastre con 25.000 cellule. Calcolo della velocità di crescita della linea cellulare.
Acquisizione immagini e time lapse 
Progetto di allestimento di un laboratorio di colture cellulare
Analisi dati e relazione dell’attività di laboratorio

 

Per una maggiore efficienza nella comunicazione tutti gli studenti che hanno messo il corso in carico didattico sono invitati ad iscriversi al corso cliccando sull'icona sottostante. Grazie.

 


Testi consigliati e bibliografia

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Il materiale didattico presentato a lezione è disponibile presso: sito web del corso

I testi base consigliati per il corso sono:
Reed R et al. Metodologie di Base per le Scienze Biomolecolari, Zanichelli, 2002
Freshney I, Animal cell culture.

E’ fortemente consigliato l’utilizzo del seguente materiale per approfondimenti e integrazioni:



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Note

STUDENTI DI BIOTECNOLOGIE: Il programma comprende le lezioni teoriche (1CFU) e parte delle attività di laboratorio (1CFU).
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Moduli didattici

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Ultimo aggiornamento: 28/09/2007 15:19
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