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PATOLOGIA GENERALE

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MFN0414B

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Anno accademico 2018/2019

Codice dell'attività didattica
GENERAL PATHOLOGY
Docente
Dott. Fabio PENNA
Insegnamento integrato
Corso di studi
Scienze Biologiche D.M. 270
Anno
3° anno
Tipologia
Propedeutico
Crediti/Valenza
4
SSD dell'attività didattica
MED/04 - patologia generale
Modalità di erogazione
Tradizionale
Lingua di insegnamento
Italiano
Modalità di frequenza
Lezioni facoltative e esercitazioni obbligatorie
Tipologia d'esame
Scritto ed orale
Prerequisiti

Basi della struttura e funzione della cellula eucariota
Basi di chimica delle macromolecole biologiche e dei processi di produzione di energia
Basi della regolazione dell’espressione genica, della trascrizione e della traduzione, della trasduzione del segnale.

Structure and function of the eukaryotic cell
Elements of chemistry of biological macromolecules and of energy production processes
Regulation of gene expression, transcription and translation, signal transduction
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Sommario insegnamento

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Obiettivi formativi

Al termine del corso gli allievi dovranno avere acquisito le conoscenze teoriche e pratiche alla base dalle comuni tecniche di colture cellulari, le caratteristiche tecniche della strumentazione utilizzata, le misure di sicurezza associate alle manipolazioni. Inoltre, dovranno conoscere l’uso delle colture cellulari come modello sperimentale. Infine dovranno aver acquisito la capacità di consultare banche dati online, di documentare e discutere i propri risultati, di saper lavorare in gruppo e di saper organizzare il proprio tempo.

At the end of the course the students will have acquired the basic
theoretical and practical knowledge of the common techniques of cell
culture, the technical characteristics of the used equipments and the
safety measures associated with the manipulation. In addition, they will
learn about the use of cell cultures as experimental models. Finally, they
must have acquired the ability to access online databases, documents
and discuss their results, to be able to work in a team and organize their
time.

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Risultati dell'apprendimento attesi

CONOSCENZA E CAPACITÀ DI COMPRENSIONE Basi teoriche delle tecniche di colture cellulari e della loro applicazione come modelli sperimentali. CAPACITÀ DI APPLICARE CONOSCENZA E COMPRENSIONE Allestimento di colture cellulari a scopo sperimentale. Utilizzo di banche dati online. AUTONOMIA DI GIUDIZIO Valutazione e interpretazione di dati sperimentali di laboratorio, Sicurezza in laboratorio. ABILITÀ COMUNICATIVE Comunicazione in lingua italiana e straniera (inglese) scritta e orale.
KNOWLEDGE AND UNDERSTANDING Theoretical basis of the techniques of cell culture and their application as experimental models. APPLYING KNOWLEDGE AND UNDERSTANDING Preparation of cell cultures for experimental purposes. Using online databases. JUDGEMENT Evaluation and interpretation of experimental data of laboratory safety in the laboratory. COMMUNICATION SKILLS Communication in Italian and foreign (English) written and oral.

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Modalità di verifica dell'apprendimento

la votazione finale sarà composta dalla somma di tre valutazioni: - presentazione articolo scientifico: capacità di comprendere il problema sperimentale ed i risultati / capacità espositiva - compilazione quaderno di laboratorio, relazione risultati (la votazione prescinde dall’esito degli esperimenti) - test (moodle) su argomenti teorici e pratici trattati durante il corso.
The final vote will be composed by the sum of three evaluations: - Scientific paper presentation: ability to understand the problem and the experimental results / display capacity - Compilation of lab notebook, report results (vote regardless of the outcome of the experiments) - Test (moodle) on theoretical and practical notions covered during the course.

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Programma

Le citochine pro-infiammatorie, processi anabolici e catabolici, cachessia neoplastica
Morte cellulare: apoptosi e necrosi
Medoti per l’analisi della morte cellulare:
- Microscopia
- Citofluorimetria
- Analisi biochimiche
Ricerca bibliografica e pianificazione esperienze di laboratorio: effetto della citochina TNFα in adipociti 3T3-L1 a differenti stadi di differenziamento
Presentazione articoli da parte degli studenti
Piastramento cellule 3T3-L1, induzione differenziamento ad adipociti
Colorazione Oil Red O per monitorare il differenziamento
Trattamento con TNFα, raccolta campioni per determinazioni successive
Valutazione degli effetti del TNFα sul differenziamento adipocitario e sulla lipolisi:
- colorazione Oil Red O e conteggio adipociti maturi
- estrazione lipidi e quantificazione spettrofotometrica
Valutazione della morte cellulare indotta dal TNFα:
- analisi morfologica, marcatura con Hoechst 33342 e mitotracker
- Lisi cellulare, dosaggio proteine, western blotting per caspasi3
Analisi dati e relazione dell’attività di laboratorio

Pro-inflammatory cytokines, anabolic and catabolic processes, cachexia
Cell death: apoptosis and necrosis
Methods for the analysis of cell death: - Microscopy
- Flow Cytometry
- Biochemical assays
Bibliographic research and planning of laboratory experiments: effects of
TNF in 3T3-L1 adipocytes at different stages of differentiation
Article presentation by students
experiments:
Plating cells 3T3-L1, induction of differentiation to adipocytes
Oil Red O staining to monitor the differentiation
Treatment with TNFα, sample collection for further determinations
Assessment of TNF effects on adipocyte differentiation and lipolysis:
- Oil Red O staining and mature adipocyte count
- Lipid extraction and spectrophotometric quantification
Assessment of TNF induced cell death:
- Morphological analysis, staining with Hoechst 33342 and mitotracker
- Cell lysis, protein assay, western blotting for caspase 3
Analysis and interpretation of results

Testi consigliati e bibliografia

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- Reed R et al. Metodologie di Base per le Scienze Biomolecolari, Zanichelli, 2002
- Animal cell culture, I. Freshney
- Kumar, Abbas, Fausto, Aster "Robbins e Cotran - Le basi patologiche delle malattie" Vol 1 Patologia generale,
vol 2 Malattie degli organi e degli apparati. VII edizione italiana a cura di V. Eusebi, Elsevier Italia 2010

- Reed R et al. Metodologie di Base per le Scienze Biomolecolari, Zanichelli, 2002
- Animal cell culture, I. Freshney
- Kumar, Abbas, Fausto, Aster "Robbins e Cotran - Le basi patologiche delle malattie" Vol 1 Patologia generale, vol 2 Malattie degli organi e degli apparati. VII edizione italiana a cura di V. Eusebi, Elsevier Italia 2010



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Ultimo aggiornamento: 15/06/2018 16:53
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