- Oggetto:
- Oggetto:
Tecnologie Ricombinanti
- Oggetto:
Anno accademico 2007/2008
- Codice dell'attività didattica
- B8584
- Docente
- Dott. Santina Cutrupi
- Corso di studi
- Scienze Biologiche
- Anno
- 3° anno
- Periodo didattico
- Terzo periodo didattico
- Tipologia
- Caratterizzante
- Crediti/Valenza
- 4CFU
- SSD dell'attività didattica
- BIO/11 - biologia molecolare
- Oggetto:
Sommario insegnamento
- Oggetto:
Obiettivi formativi
Finalità
Il corso vuole dare agli studenti una preparazione generale, ma aggiornata e precisa, sulle principali tecniche e tecnologie che vengono utilizzate per la preparazione, lanalisi e lapplicazione del clonaggio del DNA ed una conoscenza scientificamente accettabile delle principali applicazioni del DNA ricombinante e delle tecnologie derivate, ai diversi campi di ricerca e del lavoro.Obiettivi
Lallievo dovrà essere in grado di capire ed interpretare protocolli sperimentali e relazioni o lavori della letteratura, riuscendo a comprenderne la metodologia e le implicazioni tecniche. Lallievo dovrà avere una conoscenza di base del linguaggio tecnico di laboratorio in lingua inglese. Dovrà inoltre essere in grado di eseguire semplici manipolazioni di base di biologia molecolare, quali lanalisi di restrizione del DNA, lamplificazione di sequenze bersaglio con PCR, il clonaggio di DNA nel sistema plasmide/E. coli ed infine essere in grado di interrogare una banca dati di sequenze nucleotidiche, di eseguire ricerche di siti di restrizione e di primers per PCR e di realizzare semplici progetti di modificazione e clonaggio del DNA.- Oggetto:
Programma
Clonaggio del DNA, sistemi vettore-ospite.
Vettori per il clonaggio in procarioti
L’identificazione dei ricombinanti: metodi di ibridazione ed immunologici
Il sequenziamento del DNA e le strategie per il sequenziamento dei genomi
I progetti genoma, le banche-dati nucleotidiche ed i programmi in rete
La mutagenesi “in vitro”. Proteine di fusione e metodi di “tagging”.
Il clonaggio in eucarioti: S. cerevisiae e gene targeting.
Trasferimento genico in cellule animali e studio funzionale dei geni
Metodi di studio della struttura e dell’espressione genica.
Animali transgenici, knock-out, knock-in e knock-out condizionale.
Produzione di proteine ricombinanti
Sottoclonaggio di un cDNA in plasmide e selezione blu/bianco in E. coli
Selezione di colonie ricombinanti, amplificazione e purificazione plasmidica
Analisi di restrizione di un plasmide ricombinante
Interrogazione di banche dati e progettazione di un clonaggio in reteInfine sono di seguito indicati siti internet di interesse:
www.ncbi.nlm.nih.gov - http://tools.nebs.com - http://www.genome.ou.edu/protocol_book/protocol_index.html
Testi consigliati e bibliografia
- Oggetto:
- I testi base consigliati per il corso sono:
Dale and von Schantz Dai geni ai genomi EdiSes Napoli, 2003.
oppure ReeceRJ Analisi dei geni e genomi EdiSes Napoli, 2006 - Oggetto:
Moduli didattici
- Oggetto:
