- Oggetto:
- Oggetto:
Laboratorio di Tecniche di Fisiologia Cellulare
- Oggetto:
Anno accademico 2008/2009
- Codice dell'attività didattica
- B8597
- Docente
- Prof. Maria Pia Gallo
- Corso di studi
- Scienze Biologiche
- Anno
- 3° anno
- Periodo didattico
- Terzo periodo didattico
- Tipologia
- A scelta dello studente
- Crediti/Valenza
- 4 crediti
- SSD dell'attività didattica
- BIO/09 - fisiologia
- Oggetto:
Sommario insegnamento
- Oggetto:
Obiettivi formativi
Il corso si propone di fornire agli studenti le basi di alcune delle principali tecniche utilizzate in un laboratorio di fisiologia cellulare: preparazione delle soluzioni, preparazione e trattamento delle cellule per la misura sperimentale, utilizzo delle tecniche di patch-clamp e di citofluorimetria del calcio.Obiettivi
Lo studente dovrà essere in grado di gestire tutte le fasi della preparazione ed esecuzione di un esperimento di patch-clamp e di un esperimento di misura del calcio intracellulare con sonda fluorescente.- Oggetto:
Programma
La storia dell’elettrofisiologia cellulare: da Galvani al voltage-clamp
Metodi di voltage-clamp; dal voltage-clamp al patch-clamp; configurazioni del patch-clamp; metodiche avanzate di elettrofisiologia
Bioluminescenza: principi e applicazioni (equorina per le misure di calcio intracellulare); fluorescenza: principi generali
Parametri che influenzano l'intensità di fluorescenza e loro applicazioni (FRET, FRAP; fluorescenza diretta e indiretta); sonde fluorescenti: caratteristiche e applicazioni; misure in fluorescenza con i ‘quantum dots’
Sonde fluorescenti per la misura del potenziale di membrana; sonde fluorescenti per il calcio: richiami sull'omeostasi del calcio intracellulare
Sonde fluorescenti per il calcio: criteri per la scelta, calibrazione, misure raziometriche
Il microscopio a fluorescenza: principi generali, fonte di eccitazione, sistema di filtri, obbiettivi, sistemi per il rilevamento della fluorescenza
Esercitazione di patch-clamp
Esercitazione di misure di calcio intracellulare
Testi consigliati e bibliografia
- Oggetto:
- Materiale didattico
Il materiale didattico presentato a lezione è disponibile presso:
http://biologia.campusnet.unito.it/cgi-bin/home.pl
I testi base consigliati per il corso sono:
Munaron-Lovisolo, Fisiologia della cellula, Bollati Boringhieri, 2003Infine sono di seguito indicati siti internet di interesse:
http://www.olympusmicro.com/primer/techniques/fluorescence/anatomy/anatomyhome.html
http://www.olympusmicro.com/primer/techniques/fluorescence/anatomy/anatomyhome.html
http://www.lifesci.ucsb.edu/~biolum/chem/
http://opal.msu.montana.edu/cftr/IonChannelPrimers/methods_to_study_ion_channels.htm - Oggetto:
